
湖南医学高等专科学校附属湘东医院药剂科(醴陵市412200)艾司唑仑为内标,采用简单的溶液提取于40*C氮气流吹干,甲醇制成供试液进样。以甲醇:水(55:45V/V)为流动相,于240nm检测。在三个不同水平PB、DPHCBZ的平均回收率为103698.1和1026(n=6),日内和日间变异均低于5,―般合用药物对测定无干扰在分析范围内具有良好的线性关系。
苯巴比妥、苯妥英、卡马西平为常用的抗癫痫药物(AEDS)。苯巴比妥对肝药酶诱导作用而影响其它药物的正常代谢,导致血药浓度降低;苯妥英个体差异大,非线性动力学代谢特征主张给药个体化;卡马西平在治疗血药浓度范围内出现副作用,自身诱导代谢使得血药浓度和清除发生较大变化。
以上三种药物临床检测的HPLC法测定国内外报遒1-1较多,但都不同程序存在某些不足。本文建立的方法样品预处理过程简单测定快速、准确,流动相呈中性,色谱柱使用时间长,具专属性,很适合临床。
1材料与方法1.1药品与试剂内标物艾司唑仑及苯巴比妥、苯妥英、卡马西平对照品由中国药物生物制品检定所提供,空白血清由湘雅医院检验科提供,甲醇为色谱纯,乙酸乙酯为AR级试剂。水为重蒸馏水。
1.2仪器美国惠普HP1100液相色谱仪、美国惠普紫外检测器、HP3365化学工作站。1.3色谱条件色谱柱:Hypersil-ODSC18柱(5um流动相:甲醇:室温、紫外波长240nm. 1.4标准溶液制备精密称取一定量的各标准品以甲醇溶解成下列浓度的溶液:苯巴比妥25mg/ml、苯妥英2 4mg/ml、卡马西平2.3mg/ml、艾司唑仑1.5样品处理方法取血清样品400ul置具塞离心管中加入内标液10ul,混匀,加乙酸乙酯3ml渣用色谱纯甲醇100ul溶解,进样10ul. 2结果2.1三种抗癫痫药与内标色谱图在本色谱条件及提取方法下得到的空白血清及标准品与内标的色谱。
2.2标准曲线、线性范围在空白血清中加入不同浓度的苯巴比妥、苯妥英、卡马西平及内标。按样品处理方法处理后进行测定,以样品浓度C对样品与内标的峰面积比Y进行线性回归。三个药物性范围,回归方程分别如下,浓度配制。表1表1样1样2样3样4样5艾司唑仑(内)2. 2.3回收率及精密度在空白血清中加入不同浓度的苯巴比妥、苯妥英、卡马西平及内标按样品处理方法处理后进样测定,每个浓度平行操作6次,三天,其回收率及精密度见表2.药物回收率()平均回收率()RDS()曰内RDS()曰间低中高浓度结合临床设定2.4方法的专一性从临床合用药物的情况分析,试验了一些药物,结果发现,丙戊酸钠、阿普唑仑、三唑仑、氯丙嗪、氯氮平等均不影响三种药物的测定与报遒23基本一致。
3讨论3.1文章选用过254nm为检测波长,同样发现苯妥英在254nm低浓度吸收不佳张金泉,马一平,顾德良。HPLC同时测定人血清中10种抗癫痫药物及镇静催眠药。中国药学杂志时测定人血清中茶硷与苯巴比妥。苯妥英。卡马西平的合量。中国医院药学杂志1994