结核分支杆菌药物敏感性不同检测方法结果的比较北川赵亭盖亚茹屠德华离的结核分支杆菌同时采用我国现行标准浓度法、WHO/IUATLD标准1比例法和浓度法检测药物敏感性。结果WH（VIUATLD规定的耐药性标准检测的耐药率为538（5/158）我国现行标准检测结果为50. 0（7958）（P>0.05差异无显著性）WtVIUATLD耐药性检测标准检测出耐INH、SM、EMB、RFP率分别为158）经统计学处理，两标准在检测耐药性时，除INH差异有显著性（X2=184P<001）外，其余三种药物的检测结果差异无显著性。WWO/IUATID耐药性检测标准应用1比例法和浓度法检测的结果一致。结论耐药性检测标准对药物敏感性检测结果有较大影响，但相应标准下采用不同的检测方法并不影响药物敏感性结果。

　　材料与方法1.标本来源：本所中心实验室保存的北京地区1995~1998年从临床复治患者分离的158株结核分支杆菌。

　　2参比菌株来源：H37Rv由中国药品生物制品检定所提供；每批实验将该菌株做为参比对照。

　　我国现行结核分支杆菌耐药性检测标准与世界卫生组织V国际防痨及肺部疾病联合会（WHO/ IUATLD）的耐药性检测标准存在一定差异。

　　WHO/IUATLD比例法：药物检测浓度参照WHO/IUATLD标准，使用LJ培养基检测方法和结果判定采用1比例法，检测方法和结果判定标准采用浓度法。简言之，待测菌株105mg接种至对照（不含药）和含药的LJ培养基，37*C孵育4周观察结果。耐药结果判定标准参照我国现行标结果1比例法与浓度法检测结果比较待测菌株采用WHO/IUATLD耐药性检测标准，经浓度法和1比例法检测，两方法检测出的耐药率均为53.8（85八85），药敏试验结果一致。

　　说明使用的测定方法对相应标准下的药敏检测结果无影响。

　　1比例法与我国现行方法检测结果的比较1.药物敏感性结果的比较：158株试验菌株经不同检测标准和方法检测耐药性，结果见表1. 2.各药物检测结果比较：见表2 27.2（43/158）。经统计学处理，两标准在检测INH时，耐药率差异具有显著性（2= 18.4，P<0.01），其余三种药物两标准的检测结果差异无显著性（>0.05）。

　　表2 WHO/IUATLD1比例法与我国现行方法检测INH药敏试验结果比较（菌株数）我国方法合计敏感耐药敏感耐药合计注：两种方法检测的耐药率比较X2=184 0.01表3 WHO/IUATLD1比例法与我国现行方法检测SM药敏试验结果比较（菌株数）我国方法合计敏感耐药敏感耐药合计注：两种方法检测的耐药率比较X2=052P>0.05表4 WHO/IUATLD1比例法与我国现行方法检测EMB药敏试验结果比较（菌株数）我国方法合计敏感耐药敏感耐药合计注：两种方法检测的耐药率比较X2=0.71P>0.05表1 WHO/IUATLD1比例法与我国现行方法药敏试验结果比较（菌株数）我国方法1比例法合计敏感耐药敏感耐药合计由表1可见：WHO/IUATLD标准检测的耐药率为53.8（85/158），我国现行标准为50. 0（79/158）经统计学处理，两标准检测结果差异无显著性表5 WH（VIUA！LD1比例法与我国现行方法检测RFP药敏试验结果比较（菌株数）我国方法合计敏感耐药敏感耐药合计注：两种方法检测的耐药率比较X2=0.02P>0.05近年来，结核病发病率上升以及结核分支杆菌对常用抗结核药物的耐药性特别是耐多药性（MDR）的增多，对国家结核病规划实施效果的影响正在日益增加。为使国际上结核分支杆菌耐药性监测数据具有可比性，1997年WHO/IUATLD主持制定了标准化的结核分支杆菌药物敏感性监测指南1.该指南所规定的结核分支杆菌耐药性监测浓度标准有别于我国过去和当前规定的检测标准中采取的药物浓度。因此，需要评价耐药性检测时使用的药物浓度标准和检测方法对耐药性检测结果的影响，以便使我们检测的耐药性结果与国际上有可比性。

　　本实验结果表明：（）结核分支杆菌耐药性检测标准对所得结果具有一定影响。部分药物检测标准的浓度相差较大（如INH，我国现行检测标准与WHO/IUATLD规定的检测浓度相差达5倍），不同检测标准的检测结果符合性较差。特别是对从复治患者分离的菌株，由于该部分菌株具有药物接触史，因此此类菌株经过药物筛选或可能因基因突变而导致待测菌株的低抑菌浓度（MIC）发生变化。当采用浓度较低的WHO/IUATLD标准检测时，由于筛选出的耐药菌株增加，会直接影响耐药率的统计结果；对于原发耐药率的影响，尚需进一步试验予以证实。（）在相应检测标准下，使用的测定方法对检测结果不产生影响。尽管WHOUATLD采用1比例法进行药物敏感性的检测，但不排斥使用其它经质量控制证实结果可靠的方法进行耐药性的检测，本实验的结果说明测定方法对相应标准下的检测结果不产生影响。但应注意的是我国目前规定的浓度法，检测时的接种菌量较大（每支培养基接种103mg菌）。有资料显示：较大的接种菌量可能造成耐药性检测结果出现伪耐药性，特别是检测的药物浓度较低时9.为此，Canetti等11（5曾建议：适宜的接种菌量应控制待测菌株在对照培养基上生长的菌落数为100 ~250个。这样，在测定耐药性时，每支培养基接种的活菌数量约相当于1（T4~