2性使细胞保持不死。端粒酶在肿瘤发生和发展中扮演着重要角色，如何调节该酶的活性成为治疗肿瘤能是某些抗癌药物发挥作用的机制。我们观察了在原发性肝癌治疗中常用的药物对肝癌细胞端粒酶活性的影响，进步探讨它们在肿瘤治疗中的作用机制= 1材料与方法1.1材料人肝癌细胞3河河，7721是由上海第军医大学违株640掊痄液为，脱，产1端粒酶活性检测使用，1.公司的丁以，了河试剂盒，标记物为出旧山顺铂为瓜山出塔公司产品，阿霉素为深圳万乐制药厂产品，5氟尿嘧陡为上海旭东海普药业公司产品，丝裂霉素为日本协和制药株式会社产私重组人干扰素为1.2方法1.2.1细胞的培养3河肘7721细胞在含10小牛血清的即河640培养液中培养。

静脉显示仪　　1.2.210法测定各药物对细胞的生长抑制率；1.2.3处理细胞的药物浓度和时间处理细胞的药物浓度为高浓度和低浓度剂量两种，低浓度参考肘1方法测记的51浓度。浓议为低浓度的4，15倍，顺泊为。，1叫和50，处理时间为高浓度4小，和力除药物1培痄20小时4十20小时，低浓度为135人；丝裂霉尜为9，和60，儿；阿霉素为10，和100，几；5氟尿嘧啶为1000少和4000，处理方法同顺铀。干扰素为1和50001时间为359天，为，1叫间为13.5，7天1.2.5端粒酶活性的测定，细胞的裂解端粒酶捉，收集的细胞加200，0久裂解缓冲液，冰浴30，然后1500，1.，1400，84离②蛋白定量为使结果比较时保持在同水平，对裂解产物利用考马斯亮蓝。250染色法进行蛋白定池样品在丁以反应时总蛋白定量为0.5哗1反应配聊好的丁以1反应样品30C30minfJ9430seo6030secj增30循环。反应结果利用40非变性聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺亚甲叉双丙烯酰胺=191电泳，结合硝酸银染色方法观察。1.2.6端粒酶活性的比较端粒酶阳性达为从501叩开始的隔6的阶梯状条带，虽然利用1方法检测端粒酶活性可以进行半定分析，但本研允因+适合统计分析，对端粒酶活性的差异活性的比较采用肉眼直接观察的方法，比较电泳条带的光密度，根据强弱的程度分为无明显变化明显抑制和完全抑制，国外相关文献中多也是采用此种方法。

　　1.2.7流式细胞检测收集的细胞70酒精固定后。采检测含试的方法测定细胞周期和凋，2结果2.1化疗药物顺怕在150，处可细胞4小时，端粒酶活性无明显变化，而去除药物再培养20小时后端粒酶活性完全消失；10，随处理时间的延长，端粒酶活性逐渐降低，细胞出现，1期阻滞沁0，1比例由第1天的38.60到第3天的53.83和第5天的69.59.流式细胞术检测明在15，处理4+20小时端粒酶活性完全消失时，有4凋出现。丝裂霉素，慕峁，秤讼嗨疲，诒，实验使用的剂量对端粒酶活性的抑制作用弱于顺粕，6014小时无抑制，4+20小时明显抑制，抑几随处理时间的延长抑制作用逐渐增强，4 +20小时时未检测到明显凋凋比例为0.

　　而5氟尿嘧啶和阿霉素在不同剂量和不同作用时间均无明显的抑制作用，1和2.

　　天；1为丝裂霉素高浓度4小时1为丝裂霉素高浓度4 +20小时，分别为丝裂霉，低浓度，3，5天2.2干扰素对端粒酶活叱也肓明显的抑制作用似通时在第5天有明显抑制，第9天完全抑制，而5000出在第5天就完全抑制，流式细胞术检测明当端粒而对照细胞的3期比例在20，2添期比例30，出现凋高浓度低浓度第59天的调内对照9天，1分别为吓5000第3，59天闩为顺铂离浓度4小时；为顺铂离浓度4+20小时道是相似的。

　　干扰素可抑制某些癌基因的达，其中包括17在端粒酶活件的找制因素中。其中端粒酶1叫血被认为是对端粒酶活性起着屯要的调节作用4.近人取的结构和。1飞基因被只别发现以1基因5端的部分启动，编码中包含有数个蛋白联结的位心转染达。

　　⑴的质粒，的达大火捉高而端粒酶活性也升高。说明1丁尺丁基闪是转录的3因此，扰素以通过对。1；蛋白的抑制来达到对端粒酶活性的抑制作叫，取1也可能是干扰素作用的对象。干扰素对癌细胞的作用机制是很复杂的，细胞衣他存在着干扰素的受体。千扰素通过和受体结合，对多种细胞因子产生调节作。包括生长因广。蛋1激觚以传递过程等，而端粒酶的活性依赖信号传导系统和蛋白激酶的作用，因此干扰素也可能通过这些途径对端粒酶活性产生两种药物在不同作用浓度和时间对端粒酶活性均无明显抑制作用。

　　3讨论顺钔认，的联结方式卞要为；10和；的形式，而端粒和端粒酶而13161 61以1.的喊基顺正足，含这种结构。

　　因此顺铂抑制了只的达从而对端粒酶活性进行了调节，但有的研究说明1只的达和端粒酶活性的关系并无相关性因此抑制耵只对端粒酶活性是不是有直接的影响尚不能肯定。人2的研究粒对端粒酶活性的调节作用如何尚不明确。丝裂霉素，可能是通过对蛋白激酶系统抑制产生作用的，蛋白激酶参与端粒酶活性的调节而且蛋白激酶，制作用2种化疗药物在抑制端粒酶活性的，亦诱导肿瘤细胞的凋，从我们的实验结果看来，端粒酶活性的下降不足凋的结果，闪为在用，浓度顺钼或丝裂霉素，硐赴，+20小时后，只有少量的凋，而此时的端粒酶活性完全抑制。说明端粒酶活性的抑制出现在凋之前，可能药物对端粒酶活性的抑制和对端粒结构的破坏，启动了凋基因。阿霉素和5氟尿嘧啶在不同浓度，不同时间均抑制效果。流式细胞术检测的结果明，细胞在经过干扰素处理后，无论是高浓度还是低浓度，细胞周期明显阻滞在3期，说明经过干扰素作用后细胞不能进；2期。可能为，或民的合成受到抑时。这种抑制可能和端粒悔活性有关有研究7明0几浓度对51忙7721肝癌细胞诱导分化作用。何在本文中，应用丁以10，1对肝癌细胞处理后，在各个时间阶段端粒酶活性均尤明显变化前对入诱导分化与端粒酶活性影响的研允都在恶性血液病细胞，或562中进，且多数的资料说明这些细胞在分化的同时伴有端粒酶活性的下降。但并1的细胞株对1的分化治疗及现出端粒酶活性的抑制。人213土，2；疗的胸腺嘧啶的类似物，近年来的研宄显它可对某些化疗药如5，顺铂增效，逆转癌细胞对某些化疗药的耐药，而不增加毒副作用，从而又引起了研究者的注意。人2了和0财结合的部位包括端粒结构，可引起端粒0财的缩短在本文中未发现其付51姐7721肝癌细胞端粒酶活性打抑制作用，似国外的州资料9却1明能够在乳腺癌细胞和白血病细胞中抑制端粒酶活性，其确切机制未能分析。不同药物在不同文献中的结果并不完全相同，这可能与使用了不同的细胞株有关，因为不同在不同细胞中对细胞产生的作用也会略有差异。

　　从木研究结果来巧，肝癌细胞在经过干扰素及部分化疗药的处理后，端粒酶活性下降，同时伴有细胞，殖的抑制，凋的产生，且端粒酶活性下降产生凋之前，付端粒酶活性的抑制可能是这几种药物抗癌治疗机制的部分。端粒酶活性的达和肿瘤治疗后端粒酶活性的变化可作为治疗效果评价的指标及判断预后的因素。

　　000例年龄50岁而术后腋下淋巴结阳性的早期乳癌患者进行研宄。结果显，年生存率辅助化疗组为53，对照组为41；10年无复发生存率化疗组和对照组分别为47和32.另14000例术后腋下淋巴结阴性的乳癌患者50岁的临床试验结果显，术后辅助性化疗组的年生存率为78.对照组为72；10年无复发生存率化疗组为68，对照组为58.说明术后辅助性化疗明显提高了年轻早期乳癌患者特别是腋下淋巴结阳性者的生存率。

　　以蒽环类为基础的方案与，方案的疗效比较，年无复发生存率约提高3.2，10年的死率约降低2.7.

　　69岁的年龄组研宄中，4000例术后腋下淋巴结阳性的患者的试验结果显，术后化疗组和对照组的10年生存率分别是49和46；10年无复发生存率分别是43和38.对14 000例术后腋下淋巴结阴性患者5069岁进行研宄。结果辅助化疗组和对照组的10年生存率分别是71和65；10年无复发生存率在化疗组和对照组分别为66和60.以上资料明。5069岁年龄组术后化疗的生存率提高情况可能不如年龄低于50岁的患者。

　　高于70岁的患者，化学治疗的作用可能更有所区别。6 000例年龄70岁的早期乳腺癌患者，术后进入随机研宄，结果术后化疗组与对照组10年的生存率差别不大。

　　4.术后局部放疗的利弊关于术后辅助性放疗在早期乳癌患者的，总结40个临床试验共20000例患者的结果明，术后放疗减少了约10至30的局部复发率。但是。放疗组和对照组20年的生存率无明显差别，进步分析以上患者的20年生存变化。发现前10年和后10年的生存情况有很大的区别。前10年中，放射治疗组比对照组减少了约5的死率49854.这在腋下淋巴结侵犯的患者显得较明显；但在后10年中。放射治疗组的心血管因素的相关死率较高7469，这与淋巴结转移的情况无关，而对年龄50岁的患者影响更明显。故术后放射治疗可能有利于年轻50岁且淋巴结阳性的乳癌患者，而对年龄大50岁且淋巴结阴性的患者则弊大于利。

　　林桐榆摘译于1的900 IO编辑及校对钟均行